Жұқа қабатты хроматография - қозғалмайтын фаза ретінде қалыңдығы 0,1-0,5 мм сорбент қабатын қолдануға негізделген химиялық талдау әдісі. TLC әдісі әр түрлі салаларда қолданыла алады және химиялық қосылыстардың алуан түрін анықтауға мүмкіндік береді.
Әдістеме принципі
Жұқа қабатты хроматография әдісі қағаз хроматографиясынан туды және алғашқы тәжірибелер 19 ғасырдың 80-ші жылдарында жүргізілді. Бұл талдауды белсенді қолдану тек 1938 жылдан кейін басталды.
TLC техникасына жылжымалы фаза (элюент), стационар фаза (сорбент) және талданатын зат кіреді. Стационарлық фаза қолданылады және арнайы табаққа бекітіледі. Пластинаны әйнектен, алюминийден немесе пластмассадан жасауға болады - бұл қайта қолдануға болатын субстраттар, оларды жақсылап жуып, кептіріп, әр қолданғаннан кейін сорбентті қолдануға дайын болу керек. Сондай-ақ, қолданғаннан кейін лақтырылатын қағаз тақталарын пайдалануға болады.
Силикагель көбінесе стационарлық фаза ретінде қолданылады, бірақ басқа сорбенттерді, мысалы, алюминий оксидін қолдануға болады. Осы немесе басқа сорбентті қолданған кезде нәтиже дәл болуы үшін технологияны қатаң сақтау керек, мысалы, егер силикагель зертханадағы ауа тым ылғалды болса, қате нәтиже беруі мүмкін.
Еріткіштер қозғалмалы фаза ретінде қолданылады, мысалы, су, сірке қышқылы, этанол, ацетон, бензол. Еріткішті таңдауды жауапкершілікпен қарау керек, өйткені хроматографияның нәтижесі оның сапасына (тұтқырлығы, тығыздығы, тазалығы) тікелей байланысты. Әрбір талданатын үлгі үшін жеке еріткіш таңдалады.
Талдау
Үлгіні еріткіште сұйылту керек. Егер толық еру болмаса және тым көп қоспалар қалса, онда үлгіні экстракция арқылы тазартуға болады.
Үлгіні табаққа қолдану автоматты түрде немесе қолмен жасалуы мүмкін. Автоматты қолдану әрбір сынаманы субстраттың тиісті аймағына шашырататын микроспрей әдісін қолданады. Қолмен қолдану үшін микропипета қолданылады. Плитаға әр үлгі үшін қарындаш белгілері қойылады. Әр сынаманы қорғасыннан көміртекпен әрекеттеспеу үшін капиллярмен пластинкаға белгілерден жеткілікті қашықтықта бір сызықта салады.
Пластинканы ыдысқа салады, оның түбіне элюент құяды. Тірек бір шетінен ыдысқа белгіленген сызыққа дейін орналастырылады. Жылжымалы фазаның булануын болдырмау үшін ыдыс тығыз жабылған. Капиллярлық күштердің әсерінен элюент сорбент қабатымен көтеріле бастайды. Элюент белгілі бір деңгейге жеткенде, табақ ыдыстан алынып, кептіріледі.
Егер қалаған заттың түсі болмаса, онда ол субстратта көрінбейді. Сондықтан визуалдау орындалады - пластинаны йод буымен немесе басқа бояғыштармен өңдеу.
Осындай өңдеуден кейін нәтиже бағаланады. Сорбентте әртүрлі қарқындылықтағы түрлі түсті аймақтар пайда болады. Затты (немесе заттар тобын) анықтау үшін боялған аймақтарды, олардың мөлшерін, қарқындылығын және қозғалғыштығын анықтамалық үлгісімен салыстырады.
TLC әдісі кең қолданылады, өйткені ол жылдам, арзан, дәл, интуитивті, күрделі жабдықты қажет етпейді және түсіндіру оңай.
